產品FAQ

Protein Marker使用常見問題解答

發佈時間:2019-05-15 13:17:48 點擊次數:

Q:條帶模糊的原因?

A:

• 電壓過高或電泳時間過長,產熱過多導致電泳緩衝液溫度升高。建議參照Trans產品使用說明書。

• 電泳緩衝液陳舊,建議使用新鮮的電泳緩衝液,爲了獲得理想的結果建議在使用前預冷緩衝液。

• 分離膠的濃度偏低,建議使用合適的膠濃度。

• 凝膠放置時間過長,建議使用新配製的凝膠電泳。


Q: 爲什麼有時候帶型不整齊?

A:

• 建議點樣時將蛋白Marker放在泳道中間。如在凝膠兩側泳道,由於邊緣效應、離子強度不均等原因,均會導致帶型變寬或彎曲。

• 凝膠配製不勻,凝膠內存有氣泡,或點樣孔中有細碎的殘膠。


Q:電泳時蛋白Marker分離不開?

A:大多爲膠濃度不合適,要在推薦的凝膠濃度範圍內使用。此外,比較陳舊的凝膠和緩衝液也會造成電泳效果不好。


Q:預染Marker電泳後清晰,但是轉膜後顏色很淺?

A:

• 轉膜時一定要將膠和膜壓緊,否則條帶會在轉膜過程中丟失或變淺。

• 轉膜條件不適合,建議200 mA、2小時,或100 mA過夜轉膜。


Q:轉膜時甲醇的濃度是多少,會對轉膜造成什麼影響?

A:甲醇的濃度一般推薦爲15%,甲醇濃度太高易造成蛋白穿膜,轉移到濾紙上。


Q:發光液配製需要避光嗎?

A:不需要避光,但是要現配現用,配製後馬上進入暗室進行下面的操作。


Q:發光液的有效曝光時間多長?

A:發光液在2小時以內均可以曝光,但是前30分鐘曝光能力較強,隨着時間的推移可適當延長曝光時間來調節曝光強度。


Q:曝光後X光片背景很黑是什麼原因?

A:背景很黑可能是曝光時間太長或者顯影時間過長造成的。


Q:Western Marker 曝光後雜帶很多是什麼原因?

A:Marker上樣量過多或曝光時間過長,可適當減少上樣量或曝光時間。此外,二抗的濃度過高或特異性和純度不高,也會造成雜帶較多的結果。


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